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  • スポーツ医学分析部門
    • 2020年1月20日
    • 読了時間: 1分

Transfection 試薬 PEI MAXの調整と細胞へのTransfection プロトコール

更新日：2020年5月26日

細胞への遺伝子導入に汎用されるPEI MAX (https://www.cosmobio.co.jp/product/detail/psi_20120517.asp?entry_id=9269)のプロトコールです。


■1x PEI MAXの調整

1. 粉末のPEI MAXを200mgとる

2. ビーカーにPEIを移しマグネットも入れて150ml程度の水を加える

3. 粉末が完全に溶解するまでスターラーで回す

4. pHが7となるように10M NaOHを滴下する

5. 溶液をメスシリンダーに移して最終200mlとする (PEI 1mg/mlとなる)。

6. 孔径0.22 µmのメンブレンでろ過滅菌

7. 分注して4℃または-20℃保存する（4℃でも数か月保存可能）

■細胞へのTransfection

2mlのMediumに対するプロトコール

1. Plasmid DNA 6ug+ 1xPEI 18ul →生食で100ulとする

↓10分室温放置

100ul / 2ml mediumとしてアプライ

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当ラボで実施しているウェスタンブロッティングのプロトコルを作成しました。皆様の実験のご参考にしていただければ幸いです。

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