■1x PEI MAXの調整
1. 粉末のPEI MAXを200mgとる
2. ビーカーにPEIを移しマグネットも入れて150ml程度の水を加える
3. 粉末が完全に溶解するまでスターラーで回す
4. pHが7となるように10M NaOHを滴下する
5. 溶液をメスシリンダーに移して最終200mlとする (PEI 1mg/mlとなる)。
6. 孔径0.22 µmのメンブレンでろ過滅菌
7. 分注して4℃または-20℃保存する(4℃でも数か月保存可能)
■細胞へのTransfection
2mlのMediumに対するプロトコール
1. Plasmid DNA 6ug+ 1xPEI 18ul →生食で100ulとする
↓10分室温放置
100ul / 2ml mediumとしてアプライ